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为了验证上述三个基因对多年生以及生活史策略的影响,使用CRISPR/Cas9基因组编辑技术定向敲除多年生喜马拉雅须弥芥中的FLC、FLM和MAF基因,通过杂交手段将突变基因以不同的方式组合,成功再现了植物从多次结实多年生逐渐演化为二年生再转变为一年生的轨迹:当FLC、FLM和MAF三个基因都保持功能完好时,植物表现出稳健的多次结实多年生表型;缺失其中一个或两个基因会导致植物出现兼性生活史策略;而当三个基因完全缺失时,植物转变为一次结实一年生。

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其中,喜马拉雅须弥芥(Crucihimalaya himalaica)与内华达糖芥(Erysimum nevadense)为多次结实多年生植物(polycarpic perennial);小花糖芥(Erysimum cheiranthoides)为一次结实一年生植物(monocarpic annual);而卵叶须弥芥(Crucihimalaya wallichii)则呈现出兼性冬性一年生/多次结实多年生特征。

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